UFBP017-Mouse Splenic Lymphoid & Myeloid Panel（10色）
实验步骤
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生物学背景
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免疫细胞在机体内发挥着稳定机体健康的重要作用，担任着机体的免疫防御、免疫稳定和免疫监视的角色。本方案采用模型基因敲除小鼠为样本，展示小鼠体内 T 细胞、B 细胞、NK 细胞、巨噬细胞及 MDSC 细胞的表达情况变化，为做基因敲除模型小鼠检测的科研工作者提供多色流式骨架案例。
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实验信息
样本类型 Mouse spleen(C57BL/6) 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Mouse surface maker staining 使用的仪器 Beckman CytoFLEX(3L13S) -
配色方案
激光 标志物 荧光染料 克隆 体积/测试 货号 Violet 405nm CD19 BV650 BV650 5 μL 563235 L/D BV510 BV510 2 μL 564406 CD11b BV605 BV605 5 μL 563015 F4/80 BV421 BV421 5 μL 565411 Blue 488nm CD3 FITC FITC 5 μL 553061 CD4 Percp-cy5.5 Percp-cy5.5 5 μL 550954 NKP46 PE-CY7 PE-CY7 5 μL 562101 Red 640nm GR-1 APC APC 5 μL 553129 CD45 APC-CY7 APC-CY7 5 μL 557659 CD8 R718 R718 5 μL 566985 -
逻辑设门图&数据结果说明
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使用FlowJO V10.8.1对多色方案进行分析：
C57(N=3)的脾脏样本分析逻辑如上：首先 FSC-A FSC-H 去除黏连细胞获取单细胞，FSC-A SSC-A获取总目的细胞，CD45+L/D- 获取活的CD45+细胞，分别识别了 CD3+ CD4+CD8+ T 细胞 及 B cell (CD19+)、NK细胞（NKP46+）、巨噬细胞（CD11B+F4/80+） MDSC细胞(CD11B+GR-1+)。通过TSNE插件进行大数据分析，图中不同颜色岛群代表不同亚群情况，采用 violinBox 插件分析免疫细胞，横坐标代表不同指标，纵坐标代表表达丰度，数值越大丰度越高，通过“小提琴”图的表达丰度我们可以清晰的看到样本中各类指标的表达强弱，数据采集来自Beckman CytoFLEX(3L13S)流式细胞仪。