UFBP020-Analysis of Myeloid Cells in mouse Spleen（11色）
实验步骤
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生物学背景
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各种免疫细胞在骨髓中经由多能干细胞及其所分化成的髓样祖细胞（myeloid progenitor）及淋巴样祖细胞（lymphoid progenitor）分化而来。而细胞分类往往相互交叉。例如，B细胞既是淋巴细胞，又属APC；DC既参与固有免疫，又作为APC介导适应性免疫。APC在免疫微环境中扮演着重要角色，能够加工、处理抗原并将抗原信息提呈给T淋巴细胞的一类细胞，在机体的免疫识别、免疫应答与免疫调节中起重要作用。
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实验信息
样本类型 Mouse Spleen 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Mouse Spleen Surface marker staining 使用的仪器 4-laser,16-color BD FACSymphony A1 Flow Cytometer -
配色方案
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激光 标志物 荧光染料 克隆 体积/测试 货号 Blue 488nm MHC-II FITC 2G9 5 μL 565254 CD274 BB700 MIH5 5 μL 566879 VG 561nm CD86 PE GL1 5 μL 561963 L/D FVS620 / 1 μL 564996 CD23 PE-CY7 B3B4 5 μL 562825 Red 640nm XCR1 APC ZET 5 μL 148206 CD45 APC-CY7 30-F11 5 μL 557659 Violet 405nm LY6C BV421 AL-21 5 μL 562727 IgD BV510 11-26c.2a 5 μL 563110 CD11b BV605 M1/70 5 μL 563015 CD19 BV650 1D3 5 μL 563235 CD11c BV711 HL3 5 μL 563048 CD69 BV786 H1.2F3 5 μL 564683 -
逻辑设门图&数据结果说明
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对鼠的脾脏
首先根据光散射特性去黏连得到单细胞，再利用死活染料圈取所有活细胞。通过CD45圈取所有的白细胞群。再通过CD19+圈取所有的B细胞。再通过CD23和IgD进一步定义滤泡B细胞。用CD69,CD86,CD274定义其功能。用CD11+圈取髓系细胞，再分别圈取单核细胞和CD11b+DC细胞。再用CD11b-圈取DC细胞。脑图和热图，小提琴图等使用Flowjo v10软件上的T-SNE、FlowSOM，ViloinBox插件创建。