UFBP032-Mouse T B NK Panel(10色)
实验步骤
- 1
- 2
- 3
- 4
- 5
生物学背景
免疫细胞在机体内发挥着稳定机体健康的重要作用,在抵抗病原体、免疫监视和免疫监视中扮演关键角色。本方案采用正常模型小鼠为样本,展示小鼠体内T细胞、B细胞和NK细胞的表达情况变化。为细胞免疫研究提供多色流式检测的科学工作者提供多色流式检测案例。
实验信息
样本类型 Mouse spleen(C57BL/6) 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Mouse surface maker staining 使用的仪器 Beckman CytoFLEX(5L18S) 配色方案
激光 标志物 荧光染料 克隆号 体积/测试 货号 Ultraviolet 355nm CD45 BUV395 30-F11 5 μL 564279 Violet 405nm CD8 BV421 53-6.7 5 μL 563898 CD273 BV786 TY25 5 μL 741026 CD25 BV605 PC61 5 μL 563061 CD357 BV650 DTA-1 5 μL 740618 L/D BV510 / 2 μL 564406 VG 561nm CD279 PE J43 5 μL 551892 CD45R PE-CY7 RA3-6B2 5 μL 552772 Red 640nm CD49b APC HMα2 5 μL 558295 CD3 AF700 500A2 5 μL 557984 逻辑设门图&数据结果说明
△点击放大图片
△点击放大图片
使用FlowJo V10.8.1对多色方案进行分析:C57(N=3)的脾脏样本分析逻辑如上:首先FSC-A FSC-H去除粘连细胞获取单细胞,FSC-A SSC-A获取总目的细胞,CD45+L/D-获取活的CD45+细胞,分别识别了CD3+ CD4+CD8+ T细胞及B cell (CD45R+)、NK细胞(CD49b+),在TH逻辑下分析Treg以及NKT,最后又分别分析了各亚群的功能指标CD273。通过TSNE插件进行大数据分析,图中不同颜色代表不同亚群情况,数据采集来自Beckman CytoFLEX(3L13S)流式细胞仪。逻辑设门方案
△点击放大图片