UFBP040-Analysis of mouse TBNK and DC subset(20色光谱)
实验步骤
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生物学背景
淋巴细胞（lymphocyte）是白细胞中重要的细胞类型，在机体抗感染、抗肿瘤等免疫过程中发挥着重要的作用。淋巴细胞亚群（TBNK）是免疫系统中的不同类型的淋巴细胞，分为T细胞、B细胞和自然杀伤细胞（NK细胞）。它们在保护机体免受感染和疾病侵害中发挥着关键作用。DC细胞作为重要的抗原递呈细胞，可以摄取、加工和提呈抗原，诱导机体产生免疫应答。成熟的DC可以诱导T细胞极化，调节B细胞功能。除了参与适应性免疫应答，DC在固有免疫应答发挥了重要作用，体内外实验证明NK细胞和DC的相关作用产生了多种免疫学效应。
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实验信息
样本类型 Mouse spleen 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Mouse spleen Surface marker staining 使用的仪器 Cytek Aurora 全光谱流式细胞仪 -
配色方案
激光 标志物 荧光染料 克隆号 体积/测试 货号 Ultraviolet 355nm CD45 BUV395 30-F11 5 ul 564279 CD4 BUV496 RM4-5 5 ul 741050 CD27 BUV737 LG.3A10 5 ul 612831 Violet 405nm CD8 BUV805 5H10-1 5 ul 612898 L/D FVS450 / 1:1000 562247 B220 BV480 RA3-6B2 5 ul 565631 IgD BV510 11-26c.2a 5 ul 563110 CD44 BV605 IM7 5 ul 563058 CD80 BV650 16-10A1 5 ul 563687 CD86 BV711 GL1 5 ul 740688 Blue 488nm CD11c BV786 HL3 5 ul 563735 MHCII FITC 2G9 5 ul 562009 CD138 BB700 281-2 5 ul 742124 Yellow 561nm CD274 PE MIH5 5 ul 558091 NK1.1 PE-CF594 PK136 5 ul 562864 CD69 PE-CY5 H1.2F3 5 ul 104509 CD3 PE-CY7 145-2C11 5 ul 561100 CD62L PE/Fire™810 W18021D 5 ul 161205 Red 640nm IgM APC II/41 5 ul 562032 CD11b APC-CY7 M1/70 5 ul 557657 -
逻辑设门图＆数据结果说明
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使用FlowJo V10.8.1对多色方案进行分析：
小鼠脾细胞上样，通过FSC-A & SS-A去除碎片，通过SSC-A & SSC-H去除粘连细胞，通过死活染料FVS450去除死细胞。在CD45阳性表达群里分别圈T细胞、NK细胞、NKT细胞、B细胞、DC细胞。本方案进一步对T细胞进行CD4和CD8亚型，及免疫应答状态Naive、Memory、Effected进行分型分析；对B细胞进行活化、浆细胞分型分析，对DC细胞进行cDC1和cDC2亚类分析及活化分析，对NK细胞进行功能分析。