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2.16 UFBP040-Analysis of mouse TBNK and DC subset(20色光谱)

2.15 UFBP034-Mouse DC(11色) | 2.17 UFBP046-Mouse ILCS Subsets Panel(6色)

UFBP040-Analysis of mouse TBNK and DC subset(20色光谱)

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 1

    生物学背景

    淋巴细胞(lymphocyte)是白细胞中重要的细胞类型,在机体抗感染、抗肿瘤等免疫过程中发挥着重要的作用。淋巴细胞亚群(TBNK)是免疫系统中的不同类型的淋巴细胞,分为T细胞、B细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)。它们在保护机体免受感染和疾病侵害中发挥着关键作用。DC细胞作为重要的抗原递呈细胞,可以摄取、加工和提呈抗原,诱导机体产生免疫应答。成熟的DC可以诱导T细胞极化,调节B细胞功能。除了参与适应性免疫应答,DC在固有免疫应答发挥了重要作用,体内外实验证明NK细胞和DC的相关作用产生了多种免疫学效应。

  • 2

    实验信息

    样本类型 Mouse spleen
    方案类型 Multicolour panel
    实验方案 Mouse spleen Surface marker staining 
    使用的仪器 Cytek Aurora 全光谱流式细胞仪
  • 3

    配色方案

    激光 标志物 荧光染料 克隆号 体积/测试 货号
    Ultraviolet 355nm CD45 BUV395 30-F11 5 ul 564279
    CD4 BUV496 RM4-5 5 ul 741050
    CD27 BUV737 LG.3A10 5 ul 612831
    Violet 405nm CD8 BUV805 5H10-1 5 ul 612898
    L/D FVS450 / 1:1000 562247
    B220 BV480 RA3-6B2 5 ul 565631
    IgD BV510 11-26c.2a 5 ul 563110
    CD44 BV605 IM7 5 ul 563058
    CD80 BV650 16-10A1 5 ul 563687
    CD86 BV711 GL1 5 ul 740688
    Blue 488nm CD11c BV786 HL3 5 ul 563735
    MHCII FITC 2G9 5 ul 562009
    CD138 BB700 281-2 5 ul 742124
    Yellow 561nm CD274 PE MIH5 5 ul 558091
    NK1.1 PE-CF594 PK136 5 ul 562864
    CD69 PE-CY5 H1.2F3 5 ul 104509
    CD3 PE-CY7 145-2C11 5 ul 561100
    CD62L PE/Fire™810 W18021D 5 ul 161205
    Red 640nm IgM APC II/41 5 ul 562032
    CD11b APC-CY7 M1/70 5 ul 557657
  • 4

    逻辑设门图&数据结果说明

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    使用FlowJo V10.8.1对多色方案进行分析:

    小鼠脾细胞上样,通过FSC-A & SS-A去除碎片,通过SSC-A & SSC-H去除粘连细胞,通过死活染料FVS450去除死细胞。在CD45阳性表达群里分别圈T细胞、NK细胞、NKT细胞、B细胞、DC细胞。本方案进一步对T细胞进行CD4和CD8亚型,及免疫应答状态Naive、Memory、Effected进行分型分析;对B细胞进行活化、浆细胞分型分析,对DC细胞进行cDC1和cDC2亚类分析及活化分析,对NK细胞进行功能分析。