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2.17 UFBP046-Mouse ILCS Subsets Panel(6色)

2.16 UFBP040-Analysis of mouse TBNK and DC subset(20色光谱) | 2.18 UFBP048-Analysis of Major Cell Subsets in Mouse Spleen(18色光谱)

UFBP046-Mouse ILCS Subsets Panel(6色)

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 1

    生物学背景

    自然淋巴细胞(先天性淋巴细胞,ILCs)是固有免疫细胞的亚群,参与调控组织炎症及免疫过程。ILCs已发现存在于外周血、实质器官和粘膜组织中,并与多种免疫细胞(T、B、DC、巨噬细胞等)存在相互作用。在感染性疾病、肿瘤和自身免疫性疾病中发挥重要作用。靶向ILC已逐渐变为肿瘤等疾病新的免疫细胞治疗手段。ILC前体细胞在受到细胞因子等环境因素作用下,会通过启动特定转录因子表达,调控前体细胞向特定ILC亚群的分化,下图展示了CLP向ILC特定亚群分化过程中的特定转录因子表达情况。图中可以看出在ILC向ILC1分化过程中T-bet转录因子发挥关键作用,在向ILC2分化中GATA3转录因子发挥核心作用,而ILC3的分化主要依赖于RORγt转录因子。

  • 2

    实验信息

    样本类型 Mouse spleen
    方案类型 Multicolour panel
    实验方案 Flow cytometry staining was performed in the nucleus 
    使用的仪器 3-laser, 9-color NovoCyte D2111V Flow Cytometer
  • 3

    配色方案

    激光 指标 荧光素 克隆 货号 抗体量
    Violet 405nm CD3 Percp-cy5.5 17A2 560527 5 ul
    RORγt PE Q31-378 562607 5 ul
    Lin- FITC / 5 ul
    Blue 488nm CD127 APC SB/199 565448 5 ul
    Red 640nm L/D BV510 / 564406 1 ul
    GATA3 Bv421 L50-823 563349 5 ul
  • 4

    逻辑设门图&数据结果说明

    △点击放大图片

    对小鼠脾脏细胞进行特性研究:

    来自C57小鼠的脾脏进行代表性分析。首先根据光散射特性去黏连得到单细胞,再利用死活染料圈取所有活细胞。通过CD3+排除所有的淋巴细胞群。再通过Lin-CD127+圈取ILC细胞。再通过RORγt +GATA3+圈取所有的ILC3细胞。在3激光9色安捷伦流式细胞仪上采集样本。使用FlowJo v10软件进行数据分析。脑图和热图等使用FlowJo v10软件上的T-SNE插件创建。