UFBP048-Analysis of Major Cell Subsets in Mouse Spleen(18色光谱)
实验步骤
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逻辑设门方案
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生物学背景
本次实验采用Sony全光谱流式分析仪展示了小鼠免疫器官中的18色全光谱流式细胞术panel。检测CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、B细胞、巨噬细胞、粒细胞、单核细胞及树突细胞的比例及功能状态。
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实验信息
样本类型 Mouse spleen 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Mouse surface marker staining 使用的仪器 Sony ID7000(7L188S) -
配色方案
激光 指标 荧光素 克隆 货号 抗体量 355nm CD45 BUV395 30-F11 564279 1ul CD3 BUV496 145-2C11 612955 1ul CD8 BUV737 5H10-1 752639 1ul 488nm F4/80 PercpCy5.5 T45-2342 567202 1ul CD11B FITC M1/70 561688 1ul CD4 RB744 GK1.5 570488 1ul 640nm CD62L RB705 MEL-14 570282 1ul LY6G APC-CY7 1A8 560600 1ul GR-1 APC RB6-8C5 553129 1ul CD19 R718 1D3 567063 1ul CD44 BV605 IM7 563058 1ul LY6C BV421 AL-21 562727 1ul 405nm CD45R BV786 RA3-6B2 563894 1ul CD11C BV711 HL3 563048 1ul CD357 BV650 DTA-1 740618 1ul 561nm L/D FVS510 / 564406 1ul CD200R PE OX-110 123909 1ul NK1.1 PE-CY7 PK136 562062 1ul -
逻辑设门图＆数据结果说明
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使用FlowJo V10.10.1对多色方案进行分析：
Mouse spleen样本分析：FSC-A SSC-A获取总目的的细胞，CD45+L/D-获取活的CD45+细胞，分别识别了CD3+ CD4+获取TH细胞，CD3+CD8+获取TC细胞，通过CD44 CD62L分别观测TCM TEM Naive在CD4+T和CD8+T中的情况，CD19+B220+获取B cell亚群情况，NK1.1+获取NK cell，CD11B+ CD11C+获取DC，CD11B+ LY6C+获取单核细胞，CD11B+F4/80获取巨噬细胞，CD11B+LY6G+获取中性粒细胞情况，数据同时通过UMAP插件进行多元化大数据分析展示，数据采集来自Sony ID7000(7L188S)全光谱流式细胞仪。