UFBP052-Mouse T cell differentiation Panel(12色)
实验步骤
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逻辑设门方案
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生物学背景
免疫系统先天和适应性两个分支协同作用，共同发挥抗肿瘤作用，如产生细胞因子的效应CD4+T细胞、杀死肿瘤细胞并产生细胞因子的效应CD8+T细胞以及能够分化为产生抗体的浆细胞的B细胞等，肿瘤微环境可以促进或抑制肿瘤的侵袭和转移，对这种动态相互作用的了解使人们有可能在疾病的各个阶段找到新的治疗方案和治疗靶点。本实验选择皮下瘤小鼠模型探究给药后肿瘤免疫微环境情况。
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实验信息
样本类型 小鼠皮下瘤 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Mouse surface marker staining 使用的仪器 Beckman CytoFLEX(3L13S) -
配色方案
序号 指标 荧光素 克隆 货号 抗体量 405nm CD19 BV650 1D3 563235 2ul L/D BV510 / 564406 2ul IgD BV605 11-26c.2a 563003 2ul CD11C BV421 N418 565452 2ul CD69 BV786 H1.2F3 564683 2ul 488nm CD3 FITC 145-2C11 553061 2ul CD4 BB700 RM4-5 566407 2ul B220 PE-CY7 RA3-6B2 552772 2ul CD62L PE MEL-14 561918 2ul 640nm CD49B APC DX5 560628 2ul CD45 APC-CY7 30-F11 557659 2ul CD8 R718 53-6.7 566985 2ul -
逻辑设门图＆数据结果说明
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使用FlowJo V10.10.1对多色方案进行分析：
逻辑如下：首先FSC-A FSC-H去除黏连细胞获取单细胞，FSC-A SSC-A获取总目的细胞，CD45+L/D-获取活的CD45+细胞，分别识别了CD3+ CD4+CD8+ T细胞及B cell (B220+)、NK细胞（CD49b+）。通过FlowSOM插件进行聚类分析，图中不同颜色岛群代表不同亚群情况，每个群体内有不同扇形小球，那些扇形小球代表指标表达情况，数据采集来自Beckman CytoFLEX(3L13S)流式细胞仪。