UFBP003-Human monocytes Panel(4色)
实验步骤
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生物学背景
单核细胞是先天系统的重要细胞,它们是一种异质类型的细胞,由表型和功能不同的亚群组成,在免疫过程的控制、发展和转变中起着特定的作用。根据流式细胞术中表面CD14和CD16的表达,可将其分为经典、中间和非经典三个亚群。在许多病理状态,如感染、心血管和炎症疾病、癌症和自身免疫性疾病的患者中,可以观察到血液中人类单核细胞亚群水平的变化。实验信息
样本类型 Human blood 方案类型 Multicolor panel 实验方案 Surface marker staining 使用的仪器 2-laser, 4-color (3 blue/1 red) BD Accuri™ C6 Flow Cytometer Panel Design&抗体用量&克隆号选择
激光 标志物 荧光染料 克隆 体积/测试 货号 Blue 488nm HLA-DR FITC LN3 10μl abs180035 CD16 PE CB16 10μl abs180042 7-AAD PerCP-Cy5.5 / 5μl abs9104-1mg Red 640nm CD14 APC 2K14-6 10μl abs182264 逻辑设门图&数据结果说明
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使用4色的多色方案对Human Blood淋系中单核细胞进行特性研究
来自Human Blood进行代表性分析。首先通过FSC-A和SSC-A圈取主要细胞群,然后根据光散射特性去黏连得到单细胞。通过7-aad死活染料圈出活细胞,在活细胞门内,通过HLA-DR+/SSC-A圈出HLA-DR+细胞,通过CD16/CD14双参数区分出三个单核细胞亚群,即经典单核细胞(CD14+CD16-)、中间单核细胞(CD14+CD16+)和非经典单核细胞(CD16+CD14dim)。在2激光4色BD Accuri™ C6流式细胞仪上采集样本。使用Flowjo v10软件进行数据分析。