UFBP029-Human DC Panel(10色)
实验步骤
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生物学背景
人单核吞噬细胞包括表型和功能重叠的树突状细胞（DC）和单核细胞的子集，但其异质性的程度和不同的标志物的子集识别仍然难以捉摸。我们确定了不同的标记物，以达到cDC 2细分的表型和功能不同的亚群，这些炎性DC 在系统性红斑狼疮患者中扩大，并与疾病活动相关。
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实验信息
样本类型 Human blood 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Human Blood Surface marker staining 使用的仪器 Beckman CytoFLEX(5L18S) -
配色方案
激光 标志物 荧光染料 克隆号 体积/测试 货号 Violet 405nm L/D FVS510 / 1 μl 564406 CD1C BV421 F10/21A3 3 μl 565050 CD16 BV605 3G8 3 μl 563172 Blue 488nm CD45 PerCP-Cy5.5 HI30 3 μl 560777 HLA-DR FITC TU36 3 μl 555560 VG 561nm CD123 PE-Cy7 7G3 3 μl 560826 CD163 PE GHI/61 3 μl 556018 Red 640nm CD11B APC-Cy7 ICRF44 3 μl 557754 CD45RA R718 5H9 3 μl 752257 CD5 APC UCHT2 3 μl 555355 -
逻辑设门图&数据结果说明
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使用FlowJO V10.8.1对多色方案进行分析：
样本（N=2)的外周血样本分析逻辑如上：首先 FSC-A FSC-H 去除黏连细胞获取单细胞，FSC-A SSC-A获取总目的细胞，CD45+L/D- 获取活的CD45+细胞，进一步圈门获得CD11B髓系细胞比例。在CD11B+中再去分析DC 细胞比例，以及各类DC亚型分析。通过TSNI、Heatmap、ViolinBox等Flowjo插件对 CD45+L/D- 免疫细胞降维处理，全景展示样本内部各类免疫细胞情况，数据采集来自Beckman CytoFLEX(3L18S)流式细胞仪。