UFBP030-Human MDSC Panel(10色)
实验步骤
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生物学背景
免疫抑制是MDSC的主要特征。MDSC由两大类细胞组成，称为粒细胞或多形核细胞（PMN-MDSC），它们在表型和形态上均与嗜中性粒细胞相似；单核细胞（M-MDSC）‒在表型和形态上与单核细胞相似。因此，仅表型标准不足以将细胞鉴定为MDSC。在大多数类型的癌症中，PMN-MDSC占所有MDSC的80％以上。除了这两个主要种群外，MDSC还包括一小部分（少于3％）具有髓样集落形成活性的细胞，代表髓样祖细胞和前体的混合物。
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实验信息
样本类型 Human blood 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Human surface maker staining 使用的仪器 Beckman CytoFLEX(5L16S) -
配色方案
激光 标志物 荧光染料 克隆号 体积/测试 货号 Violet 405nm CD14 BV421 MφP9 3 μl 563743 CD33 BV480 P67.6 3 μl 746366 CD16 BV605 3G8 3 μl 563172 Blue 488nm CD15 PERCP-CY5.5 H198 3 μl 560828 HLA-DR FITC TU36 3 μl 555560 VG 561nm CD62L PE DREG-56 3 μl 555544 CD68 PE-CY7 Y1/82A 3 μl 565595 Red 640nm CD45 APC-R700 H130 3 μl 566041 L/D fvs780 / 1 μl 565388 CD38 APC HIT2 3 μl 555462 -
逻辑设门图&数据结果说明
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使用FlowJO V10.8.1对多色方案进行分析：Human的外周血样本分析逻辑如上：首先 FSC-A FSC-H 去除黏连细胞获取单细胞，FSC-A SSC-A获取总目的细胞，CD45+L/D-获取活的CD45+细胞，分别识别了 HLA-DR-CD16细胞群体，再通过CD68-CD33排除巨噬细胞得到MDSC细胞群体，用CD15和CD14获取MDSC不同亚型。通过TSNI插件进行大数据分析，图中不同颜色代表不同亚群情况，以及flowsom进行聚类得到热度图。数据采集来自Beckman CytoFLEX(5L16S)流式细胞仪。