1.6 UFBP013-Human TH17/Treg Intracellular Stain(8色)

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T淋巴细胞，是由来源于骨髓的淋巴干细胞，在胸腺中分化、发育成熟后，通过淋巴和血液循环而分布到全身的免疫器官和组织中发挥免疫功能，按细胞表面分化抗原(CD)的不同,可分为CD4+T和CD8+T两大亚群，其中CD4 Th细胞在免疫调节中起促进作用，其功能为产生多种细胞因子，传递抗原信息，促进T、B细胞分化增殖，辅助B细胞产生抗体和诱导迟发性变态反应等 。目前Th细胞最常检测Th1、Th2、Th17 和T reg 四个亚群，其分泌的细胞因子及行驶的功能在疾病研究中都具有深远意义。本方案采用感染类疾病病人样本，展示在外周血病人样本中 TH1 TH17 Treg 的多色骨架panel。

样本类型	Human PBMC
方案类型	Multicolour panel
实验方案	Human Intracellular staining
使用的仪器	Beckman CytoFLEX(3L13S)

激光	标志物	荧光染料	克隆	体积/测试	货号
Violet 405nm	L/D	FVS510	/	2μl	564406
	CD25	BV421	M-A251	5μl	562442
	IFN-γ	BV605	B27	5μl	562974
Blue 488nm	IL-17A	BV650	N49-653	5μl	563746
	CD45	PerCP-Cy5.5	H130	5μl	564105
	FOXP3	PE	236A/E7	5μl	560852
Red 640nm	CD4	BB515	RPA-T4	5μl	564419
	CD3	APC-Cy7	SK7	5μl	557832

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使用FlowJO V10.8.1对多色方案进行分析：

Human PBMC样本分析逻辑如上：首先 FSC-A FSC-H 去除黏连细胞获取单细胞，FSC-A SSC-A 获取总目的细胞，CD45+L/D- 获取活的CD45+细胞，分别识别了 CD3+ CD4+获取TH 细胞 ，在TH CD4+逻辑下检测 IFN-γ，IL-17a,CD25+Foxp3+，分别鉴定为Th1、Th17、Treg细胞，通过TSNI插件进行大数据分析，图中不同颜色代表不同亚群情况，采用 violinBox 插件分析，“云峰”高度代表不同指标的表达强弱，通过图中也能明显对的发现样本经过刺激后 出现胞吞现象，CD4 荧光强度变弱，数据采集来自Beckman CytoFLEX(3L13S)流式细胞仪。