UFBP038-Human T cells Subset Panel(7色)
实验步骤
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生物学背景
Human血液样本的7色T细胞分型
T细胞可塑性对于在不同微环境中的免疫应答的适应很重要，传统上根据CD45亚型的表达与否，将人的T细胞分为初始T细胞（CD45RA+）和记忆T细胞（CD45RA‒）。根据归巢特点和效应功能将记忆CD4+和CD8+T细胞至少分为两个亚群：中央型记忆T细胞（central memory T cells，TCM）和效应型记忆T细胞（effector memory T cells，TEM）。与初始T细胞相比，记忆T细胞的频率显著增加；表达不同的表面标志、细胞因子和细胞内效应分子；当再一次接触同一抗原刺激时，具有较低的活化阈值和较强的效应功能；表达不同的趋化因子和黏附分子受体；具有自我更新的能力。为此，免疫记忆为机体提供了长期的，甚至终生的免疫应答。深入研究免疫记忆的发生、发展和体内维持因素，同时检测多种T细胞表面标志来鉴定记忆T细胞亚群、功能和形成途径，对于设计有效的疫苗具有十分重要的意义，也是疫苗免疫的基础。 -
实验信息
样本类型 Human blood 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Surface marker staining 使用的仪器 3-laser，12-color（5 Violet/4 blue/3 red）BD FACSCelesta Flow Cytometer -
逻辑设门方案
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逻辑设门图&数据结果说明
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使用7色的多色方案对Human Blood淋系中T细胞进行特性研究
来自Human Blood进行代表性分析。首先通过FSC-A和SSC-A圈取主要细胞群，然后根据光散射特性去黏连得到单细胞。通过FVS510死活染料圈出活细胞，在活细胞门内，通过CD3+/SSC-A鉴定T细胞，接着通过CD4+/CD8+识别Th细胞（CD4+T）和Tc细胞（CD8+T）再通过CD45RA+CD45RO-识别Naive T细胞，最后通过CCR7+-/SSC-A检测中央型记忆T细胞（central memory T cells TCM）和效应型记忆T细胞（effector memory T cells，TEM）。在3激光12色BD FACSCelesta流式细胞仪上采集样本。使用Flowjo v10软件进行数据分析。