UFBP041-Human Lymphocytes and myeloid cells Panel(24色)
实验步骤
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生物学背景
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免疫细胞来源于造血干细胞，随着分化发育，分为髓系和淋系大类细胞群。
本方案提供多色流式骨架案例，可用于比较淋系和髓系大类细胞群，筛选髓系细胞如中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞及其亚型，及淋系细胞T细胞、B细胞、NK细胞、NKT和Treg，并了解功能指标CD45RA、CCR7、CD69、CD25、CD28、PD-1、Tim-3、PD-L1的表达情况。CD45RA、CCR7、CD28可以监测T细胞免疫应答情况。CD69对多种血细胞的激活、增殖和分化起重要作用，并与某些疾病的发生发展有关，是一个重要的多向性免疫调节分子。CD28、PD-1、Tim-3、PD-L1是免疫检测点相关分子，是天然免疫和适应性免疫的重要开关。
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实验信息
样本类型 Human PBMC 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Surface marker staining 使用的仪器 BD FACSDiscover S8 5-laser -
配色方案
序号 指标 荧光素 克隆 货号 抗体量 355nm CD45RA BUV395 5H9 UF740315S 1ul CD4 BUV496 SK3 612936 1ul CD279 BUV737 EH12.1 612791 1ul CD8 BUV805 SK1 UF612889S 1ul 405nm CD14 BV421 MφP9 563743 1ul CD19 V450 HIB19 560353 1ul CD45 V500 H130 560777 1ul HLA-DR BV510 G46-6 563083 1ul CD15 BV605 W6D3 562980 1ul TIM-3 BV650 7D3 565564 1ul CCR7 BV711 3D12 563712 1ul CD16 BV786 3G8 563690 1ul 488nm CD86 BB515 2331(FUN-1) 564544 1ul CD28 FITC CD28.2 556621 5ul CD3 PerCP 7F5 abs182424 5ul CD69 RB705 FN50 570279 1ul CD337 PE p30-15 558407 1ul 561nm TCRgd RB744 11F2 570494 1ul CD25 PE-CF594 M-A251 562403 1ul CD56 PE-CY5 B159 555517 5ul CD274 PE-CY7 MIH1 558017 1ul 633nm CD127 APC 3H5 abs182481 5ul CD34 R718 563 751969 1ul CD11b APC-CY7 ICRF44 557754 1ul -
逻辑设门图&数据结果说明
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图a. 来自Human Blood进行常规代表性分析，在BD FACSDiscover S8光谱流式细胞仪采集样本，使用Flowjo v10进行数据分析。
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图b. 通过Flowjo插件TSNE的使用，对数据进行降维，并带入常规圈门逻辑，显示样本间不同细胞群体变化，大幅度集成数据的可视化和信息量。
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图c. 对CD45+细胞进行ClusterExplorer分析，可以探索不同Cluster上不用指标的表达情况。
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图d. 使用ViolinBox plot对不同样本间数据进行分析比较。
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图e. 对T细胞Cluster使用Sunburst插件展示层级结构，直观表现出各级数据间之间的比例关系。