UFBP042-Human TBNK Panel(11色)
实验步骤
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生物学背景
T、B淋巴细胞亚群和NK细胞在各种临床疾病，如自体免疫性疾病、免疫缺陷、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、再生障碍性贫血、病毒感染疾病、恶性肿瘤、免疫治疗等中均会发生异常改变。这些指标的检测对监测机体的免疫功能、控制上述疾病的发生和发展、了解疾病的机制、指导临床治疗具有极其重要的意义。
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实验信息
样本类型 Human blood 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Blood isolation surface and intracellular marker staining 使用的仪器 3-laser, 11-color (4 violet/4 blue/3 red) Attune® NxT -
配色方案
激光 指标 荧光染料 克隆号 货号 抗体量 Violet 405nm CD19 BV510 SJ25C1 562947 5 μl CD25 BV421 M-A251 562442 5 μl PD-L1 BV605 M1H1 740426 5 μl CD56 BV711 NCAM16.2 563169 5 μl Blue 488nm CD4 FITC RPA-T4 555346 5 μl CD16 PE CB16 abs180042 5 μl CD3 Percp-cy5.5 SP34-2 552852 5 μl CD127 PE-CY7 HIL-7R-M21 560822 5 μl Red 640nm CD20 APC 7F2 abs182452 5 μl CD8 APC-R700 PRA-T8 565165 5 μl CD45 APC-CY7 2D1 557833 5 μl -
逻辑设门图&数据结果说明
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使用T细胞亚群多色方案对Human Blood 淋系和髓系细胞进行特性研究。来自Human Blood进行代表性分析。首先根据SSC-A和SSC-A圈中目的细胞，再利用光散射特性去黏连得到单细胞。通过FVS死活染料圈出活细胞，识别了CD45+白细胞。再通过CD3+确定T细胞，CD16+CD56+确认NK细胞，CD19+CD20+确认B细胞，随后通过CD4+确认辅助T细胞；再进行CD3-非T细胞圈门，通过CD19+/CD20+识别Treg。在3激光11色Attune*NxT流式细胞仪上采集样本。使用FlowJOv10软件进行数据分析。
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通过对contact进行T-SNE降维分析，生成如上流式结果图，利用热力图展示不同的biomarker的表达情况以及其具体的内在联系，在可视化和信息集成化上更有优势，关键细胞靶点的表达情况也一目了然。
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同时通过对contact进行T-SNE降维分析，生成如上流式结果图，利用热力图展示不同的biomarker的表达情况以及其具体的内在联系，在可视化和信息集成化上更有优势，关键细胞靶点的表达情况也一目了然。