UFBP047-Analysis of Major Cell Subsets in Human Blood(21色光谱)
实验步骤
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逻辑设门图
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生物学背景
检测Human的外周血中的免疫细胞在免疫相关性疾病的诊断、预后监测和个体化治疗中具有重要意义。外周血基础免疫细胞亚群主要包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤(NK细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞等);此外还可以结合免疫细胞分化发育、功能和活化状态等相关标志物进一步做精细分群,如调节性T细胞、记忆性T细胞、效应性T细胞等免疫细胞亚群,本次实验通过Sony ID7000 全光谱流式细胞仪检测Human外周血中21个亚群指标。
实验信息
样本类型 Human PBMC 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Human surface marker staining 使用的仪器 Sony ID7000(7L188S) 配色方案
序号 指标 荧光素 克隆 货号 抗体量 355nm CD3 BUV805 UCHT1 612895 1ul CD4 BUV496 RPA-T4 741134 1ul 488nm HLA-DR Percp-cy5.5 G46-6 552764 1ul CD14 FITC M5E2 555397 1ul CD57 BB515 NK-1 565285 1ul CD19 RB780 HIB19 755602 1ul CD25 RB744 M-A251 570620 1ul 640nm CD45 APC-CY7 2D1 557833 1ul CD38 APC 3KG38-12 abs182270 1ul CD8 APC-R700 HIT8a 566857 1ul 405nm CD15 BV605 W6D3 562979 1ul CD11C BV421 BU15 566877 1ul CCR7 BV786 3D12 563710 1ul CD56 BV711 NCAM16.2 563169 1ul CD45RA BV650 HI100 563963 1ul L/D FVS510 / 564406 1ul IGD BV480 IAg-2 566138 1ul CD11b V450 ICRF44 560480 1ul 561nm CD138 PE 1G8 abs182490 1ul CD16 RY610 B73.1 759228 1ul CD127 PE-CY7 HIL-7R-M21 560822 1ul 逻辑设门图&数据结果说明
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使用FlowJo V10.10.1对多色方案进行分析Human PBMC样本分析:FSC-A SSC-A获取总目的细胞,CD45+L/D- 获取活的CD45+细胞,分别识别了CD3+ CD4+获取TH CD25+CD127+获得Treg细胞,CD3+CD8+获取TC细胞,通过CD45RACCR7 分别观测TCM TEM Naive在CD4+T和CD8+T中的情况,CD3+CD57+检测T细胞衰老情况,CD19+IGD+CD38+获取B cell亚群情况,CD56+获取NK细胞,CD11B+HLA-DR+CD11C+获取DC,CD14+CD16+获取单核细胞情况,数据同时通过UMAP插件进行多元化大数据分析展示,数据采集来自Sony ID7000(7L188S)全光谱流式细胞仪。