UFBP047-Analysis of Major Cell Subsets in Human Blood(21色光谱)
实验步骤
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生物学背景
检测Human的外周血中的免疫细胞在免疫相关性疾病的诊断、预后监测和个体化治疗中具有重要意义。外周血基础免疫细胞亚群主要包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤（NK细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞等）；此外还可以结合免疫细胞分化发育、功能和活化状态等相关标志物进一步做精细分群，如调节性T细胞、记忆性T细胞、效应性T细胞等免疫细胞亚群，本次实验通过Sony ID7000 全光谱流式细胞仪检测Human外周血中21个亚群指标。
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实验信息
样本类型 Human PBMC 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Human surface marker staining 使用的仪器 Sony ID7000(7L188S) -
配色方案
激光 指标 荧光素 克隆号 货号 抗体量 355nm CD3 BUV805 UCHT1 612895 1 μl CD4 BUV496 RPA-T4 741134 1 μl 488nm HLA-DR Percp-cy5.5 G46-6 552764 1 μl CD14 FITC M5E2 555397 1 μl CD57 BB515 NK-1 565285 1 μl CD19 RB780 HIB19 755602 1 μl CD25 RB744 M-A251 570620 1 μl 640nm CD45 APC-CY7 2D1 557833 1 μl CD38 APC 3KG38-12 abs182270 1 μl CD8 APC-R700 HIT8a 566857 1 μl 405nm CD15 BV605 W6D3 562979 1 μl CD11C BV421 BU15 566877 1 μl CCR7 BV786 3D12 563710 1 μl CD56 BV711 NCAM16.2 563169 1 μl CD45RA BV650 1D4 abs182468 2 μl 561nm CD138 PE 1G8 abs182490 1 μl CD16 RY610 B73.1 759228 1 μl CD127 PE-CY7 HIL-7R-M21 560822 1 μl -
逻辑设门图&数据结果说明
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使用FlowJo V10.10.1对多色方案进行分析Human PBMC样本分析：FSC-A SSC-A获取总目的细胞，CD45+L/D- 获取活的CD45+细胞，分别识别了CD3+ CD4+获取TH CD25+CD127+获得Treg细胞，CD3+CD8+获取TC细胞，通过CD45RACCR7 分别观测TCM TEM Naive在CD4+T和CD8+T中的情况，CD3+CD57+检测T细胞衰老情况，CD19+IGD+CD38+获取B cell亚群情况，CD56+获取NK细胞，CD11B+HLA-DR+CD11C+获取DC，CD14+CD16+获取单核细胞情况，数据同时通过UMAP插件进行多元化大数据分析展示，数据采集来自Sony ID7000(7L188S)全光谱流式细胞仪。