UFBP053-Human T/B/NK/DC Panel(11色)
实验步骤
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逻辑设门方案
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生物学背景
在人体内，T细胞介导细胞免疫以杀伤入侵的病原体，还可以辅助B淋巴细胞发挥体液免疫功能，协助B细胞顺利产生抗体；通过产生抗体发挥特异性体液免疫功能，也可作为抗原提呈细胞摄取、加工并提呈抗原；树突状细胞（DC）是一种具有强大的抗原提呈递呈功能的细胞，是先天免疫和适应性免疫之间的桥梁；NK细胞即自然杀伤细胞，发挥着重要的抗肿瘤、抗病毒感染的作用；单核细胞则以其强大的吞噬能力来清除受伤和衰老细胞。通过流式细胞仪对血液中的免疫细胞进行分析，有助于进行疾病诊断，准确评估免疫功能。
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实验信息
样本类型 Human PBMC 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Human Surface marker staining 使用的仪器 BD FACSCelesta (3L12C) -
配色方案
激光 指标 荧光素 克隆号 货号 抗体量 405nm HLA-DR BV510 G46-6 563083 2 μL CD4 BV605 SK3 566908 2 μL CD11C BV421 N418 565452 2 μL CD8 BV786 RPA-T8 563823 2 μL 488nm CD56 FITC MY31 abs182382 2 μL CD14 Percp 2K14-6 abs180059 2 μL CD19 RB780 SJ25C1 568677 2 μL CD11B PE M1/70 abs180040 2 μL 640nm CD28 APC CD28.2 abs180032 2 μL CD45 APC-CY7 30-F11 557659 2 μL CD3 AF700 UCHT1 557943 2 μL -
逻辑设门图&数据结果说明
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使用FlowJo V10.10.1对多色方案进行分析。
Human PBMC样本分析逻辑如下：首先FSC-A FSC-H去除黏连细胞获取单细胞，FSC-A SSC-A获取总目的细胞，CD45+获取活的CD45+细胞，分别识别了CD3+ CD4+获取TH细胞，CD3+CD8+获取TC细胞，CD56+获取NK细胞，CD19+获取B细胞CD11B+获取髓系细胞，分别在CD11B+逻辑下获取CD14+单核细胞和CD11C+HLA-DR+DC细胞，采用ViolinBox插件分析免疫细胞，纵坐标代表不同指标，横坐标代表表达丰度，数值越大丰度越高，通过“小提琴”图的表达丰度我们可以清晰的看到样本中各类指标的表达强弱，数据采集来自BD Celesta(3L13S)流式细胞仪。