UFBP056-Deep Analysis of TBNK Cell In Human Blood/PBMC(22色光谱)
实验步骤
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生物学背景
针对样本中T、B、NK细胞的免疫特征评估往往是一项极具挑战性的工作。以往，常规做法是采用多种独立实验手段分别聚焦于T、B、NK细胞各自的监测与分析。比如，先是运用特定的免疫组化染色方法，只为精准测定T细胞在样本组织里的分布范围与数量占比；再利用酶联免疫吸附试验（ELISA），间接推测B细胞分泌抗体相关的蛋白表达水平；对于NK细胞，又得借助专门的细胞毒性检测实验以及配套的免疫荧光标记技术，来综合评判其活性状态与表面标记物表达情况，这般流程繁琐又耗时，各环节衔接中还易产生误差与数据偏差。然而，随着流式细胞技术持续革新进步，特别是光谱流式细胞分析技术的崛起，其检测精准度与多参数识别能力大幅跃升。如今，单管多荧光标记结合光谱流式细胞仪的方案愈发完善，能在同一样本里一次性对T、B、NK细胞开展全方位解析。本方案便是依托先进的光谱流式细胞仪，针对人外周血以及外周血单个核细胞（PBMC）里的T、B、NK细胞进行系统评估，深入挖掘它们独特的免疫表型、数量比例关系以及功能相关的蛋白表达状态。并且在研究进程中，惊喜发现过去熟知的某些生物标志物，在这三类细胞不同亚群细分之下，竟呈现出此前未曾察觉的新表达模式与分群特征，为深入探究机体免疫调控机制开拓崭新视角。 -
实验信息
样本类型 人外周血（肝素钠抗凝保存）人PBMC（经过梯度密度离心） 方案类型 多色流式 使用的仪器 索尼ID7000—全光谱流式细胞仪 -
panel方案
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逻辑设门图&数据结果说明
常规多色数据分析：
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分析逻辑
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使用降维分析法（UMAP）对全CD45+样本信息进行降维，生成降维图后将常规多色数据分析代入观察整体亚群关系：
样本经过UMAP降维后结果如下：将常规多色数据分析代入UMAP，观察整体亚群关系：
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再次直接对lymp门进行降维，进一步代入深度淋巴亚群探究其关系：
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观察关键蛋白在整体细胞亚群上的表达情况：
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对样本中的CD4-CD8-细胞群进行深入的自动聚类分析，并通过热力表达方式图探究其蛋白表达差异：
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