酵母蛋白提取操作步骤
以下流程是按照Biovision的8003试剂盒来进行为例，如果使用其他品牌的试剂盒，可以参考其说明书进行操作。
| 货号 | 规格 |
| 8003-100 | 100ml(20g-40g样品) |
| 8003-500 | 500ml(100g-200g样品) |
* 请将试剂保存于4°C避光处。
* 注意:为防止蛋白质降解，需要及时加蛋白酶抑制剂。
实验步骤
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- 4
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收集细胞
将培养好的酵母3000g 4°C离心5min来沉淀细胞。离心后可立即处理细胞，或将细胞沉淀物保存在-20°C或-80°C下;
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裂解
将细胞重悬于酵母蛋白提取缓冲液中(每OD酵母培养液加1ml)，轻轻涡旋直到混合物均匀为止。在30°C条件下振荡孵育酵母细胞悬浮液20min，使其充分裂解;
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离心
涡旋离心管30s，然后在4°C 12,000g离心15min;
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取上清
收集上清液(即裂解物)，样品制备完成，制备好的样品可以分装保存于-80°C中。