轻轻倒掉培养皿或者培养瓶中的培养基，并吸掉残余液体，按照10cm的培养皿加1ml的预冷PBS，润洗3次，洗掉残余培养基，吸掉PBS；

将培养皿放在冰上，往10cm的培养皿加500μl的细胞裂解液，裂解液需要提前加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂，冰上裂解10—20min;

裂解好之后，用干净的细胞刮快速刮下来，收集细胞碎片和裂解液，转移至1.5ml EP管中，整个过程需在冰上进行;

4°C 12000rpm离心5min，收集上清，分装保存于-20°C或者-80°C中备用。