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蛋白质免疫印迹(Western blotting)是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的特定蛋白的方法。该方法是将不同分子量的蛋白质经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离开来后,转移到固相支持物(如PVDF膜、NC膜)上,利用抗原抗体反应来检测目的蛋白质的方法。 整个实验过程中,从样品制备到抗体孵育,每个步骤对实验结果都至关重要。本手册按照Western blotting的实验流程,对各个步骤的操作方法和注意事项都进行了详细的介绍。除此之外,本手册还总结了实验中的各种小的Tips供大家参考。
1. 样品制备
1.2 蛋白定量
2. 上样与电泳
2.1 上样
2.2 电泳
3. 转膜
3.1 转膜过程需要准备的产品
3.2 步骤
4. 封闭
5. 抗体孵育/检测
5.2 步骤
6. 疑难解答
7. 常见WB指标实验Tips