神经科学研究中,多重免疫荧光技术是解析复杂脑组织细胞图谱的关键工具。传统多重染色经常遭遇一抗物种来源冲突,多个靶标无法同时标记,极大限制多维度共定位观察。CST 开发独特的嵌合抗体技术,借助基因工程改造,将高特异性单克隆抗体的抗原结合区,搭配不同宿主物种的抗体骨架重组,得到全新重组单克隆抗体。基于这套嵌合抗体,科研人员可沿用原有实验体系,灵活设计多色免疫荧光检测,拓展神经样本的研究维度。
神经元与胶质细胞表征
利用嵌合抗体,能够在同一张组织切片上同时分辨神经元、星形胶质细胞以及小胶质细胞,实现多种神经细胞类型同步成像分析。
图注:小鼠脑组织切片神经元与胶质细胞多重荧光染色,β3‑Tubulin、Iba1、GFAP 多靶标共标记,DAPI 复染细胞核。
传统方案想要同时标记这三类细胞,经常会遇到一抗宿主物种重复,不得不拆分多张切片,切片间个体差异会干扰真实共定位结果。CST 嵌合单克隆抗体突破物种桎梏,单张切片完成多种神经细胞同时标记,减少样本个体偏差,提升实验数据可靠性。
检测淀粉样斑块并解析周围细胞病理状态
在神经退行性疾病研究,例如阿尔茨海默病模型样本中,科研人员重点关注淀粉样斑块微环境。借助嵌合抗体多标记能力,可对斑块及周边细胞进行多重标记,直观解析斑块周围不同细胞亚型的病理特征。
图注:阿尔茨海默模型小鼠脑组织,β‑Amyloid、Iba‑1、Dectin‑1/Clec7a 多重染色,解析淀粉样斑块周围小胶质细胞活化状态。
通过多色共定位,直接观察斑块与免疫细胞空间互作关系,无需多次重复制片,节约珍贵动物组织样本。
绘制功能性神经元活动图谱
针对激活态神经元研究,嵌合抗体也支持对活体神经元群体开展高保真多靶标检测,同时标记细胞标志物与神经元激活标志物,绘制功能神经元活动图谱。
图注:小鼠脑组织功能神经元多重免疫荧光,NeuN、酪氨酸羟化酶、c‑Fos 共染识别激活的多巴胺能神经元。
实验考量与优化建议
即便使用性能优异的嵌合抗体,多重荧光依旧需要做好关键条件优化:
1,抗体浓度:抗体信号存在浓度、时间、温度依赖性,优先参考说明书稀释范围,根据样本类型微调;浓度过高增加背景,过低会造成信号缺失。
2,孵育条件:更长时间、更低温度孵育可提升特异性,推荐 4℃过夜孵育。
3,二抗选择⚠️:当嵌合抗体与普通一抗宿主物种相同时,务必选用 Fc 片段特异性二抗,规避非特异性结合,二抗错配是多重荧光最常见失败诱因。
优宁维作为 CST 授权代理商,可为广大科研工作者提供全套嵌合抗体及配套实验试剂,助力神经多重免疫荧光项目落地,相关海报资料可向优宁维技术顾问索取。
FAQ
Q1:嵌合抗体和普通单抗主要差别是什么?
A:抗原识别区域不变,抗体 Fc 骨架更换为其他物种,解决多重染色中一抗物种冲突问题,抗原识别特异性不受影响。
Q2:原来的实验方案可以直接套用 CST 嵌合抗体吗?
A:抗原识别位点不变,实验流程基本兼容,重点需要重新匹配二抗,优化抗体工作浓度和孵育条件。
Q3:嵌合抗体只能用于脑组织样本吗?
A:不只局限神经样本,只要靶标蛋白保守,其他组织同样可用于多重免疫荧光染色。
| 名称 | 货号 | 规格 |
| beta3-Tubulin (D71G9) Mouse Chimeric mAb | 70668T | 20 ul |
| TMEM119 (E4B9S) Mouse mAb | 98778T | 20 ul |
| Iba1/AIF-1 (E4O4W) Mouse Chimeric mAb | 58410T | 20 ul |











